Меню

Антибиотики для выращивания грибов

Основы выращивания псилоцибиновых грибов для новичков (часть 2, практика)

Введение в основы грибоводства дано в предыдущей статье, а теперь остановимся подробно на самом процессе.

ПОЭТАПНЫЙ ПРОЦЕСС

Выращивание грибов можно поделить на 6 этапов: подготовка спор, подготовка субстрата, инокуляция, рост мицелия, выставление на плодоношение и сбор урожая (о сборе урожая читайте в предыдущей статье).

Споровый отпечаток или споровая взвесь (есть и другие «носители» спор, например, кусок плодового тела, но для новичков это не идеальные варианты). Споры — это «семена», из которых прорастёт мицелий (белая плотная грибница), а из него вырастут грибы. Споровый отпечаток может быть приобретён законно на территории РФ и храниться до 2 лет в тёмном сухом месте без доступа кислорода, а споровая взвесь — до месяца в холодильнике. Одного спорового отпечатка хватает на 5-15 банок, в зависимости от выбранной концентрации в процессе приготовления споровой взвеси.

Споровый отпечатокв зиплоке, использованный наполовину

Обычно новичкам рекомендуют заказывать уже готовую взвесь, поскольку её приготовление из отпечатка связано с требованиями стерильности, а это может показаться сложным и трудоёмким. Тем не менее, отпечатки дают большую свободу в хранении и использовании по мере необходимости. Также есть информация, что споровая взвесь может содержать псилоцибин, поэтому правоохранительные органы могут заинтересоваться этой посылкой.

Споровая взвесь

Как приготовить споровую взвесь?

Помимо спорового отпечатка понадобится физраствор (обычно продаётся в стеклянных банках с резиновой крышкой), шприц на 5 кубиков, гентамицин в ампулах (по желанию), стерильные перчатки, хирургическая маска, медицинская шапочка, спирт, огонь, нож или игла.

Стерильный физраствор

Схематично это выглядит так: игла или кончик ножа прокаливается над пламенем, поршень шприца вынимается, споровый отпечаток подносится к шприцу, иглой/ножом соскабливается часть спор в шприц, поршень вставляется обратно, игла шприца прокаливается, физраствор набирается в шприц, на иглу надевается колпачок, шприц отправляется в холодильник на сутки. Примерно за 30 минут до введения взвеси в субстрат в шприц добавляется 10-20% (от общего объёма взвеси) гентамицина, который создаёт дополнительную защиту от враждебных организмов. Есть мнение, что гентамицин несколько замедляет рост мицелия.

Процесс приготовленияспоровой взвеси, фото из интернета

Процесс очень прост, но требует стерильности. Все действия необходимо проводить в помещении без движения воздуха и вентиляции. Чаще всего используют раковину в санузле, предварительно необходимо убрать из комнаты все предметы и протереть спиртом все поверхности. В идеале обработать помещение пульверизатором с дезинфицирующим раствором или, ещё лучше, использовать кварцевую лампу (внимание: во время работы лампы в помещении не должно быть людей, животных, растений и полезных спор). На теле должна быть чистая одежда, маска, перчатки и шапочка.

Переносная домашняя кварцевая лампа

С опытом можно незначительно менять способы создания стерильности, но для первых разов это оптимальный вариант. Для тех, кто готов потратить больше времени на приготовления, рекомендуется изготовить бокс. Обычно это пластмассовая ёмкость, зарытая сверху стеклом, по бокам имеет вырезанные отверстия для рук, к которым приклеиваются хирургические перчатки.

Достойный и аккуратный вариант бокса. Для стерильных процессов достаточно будет и варианта без лампы.

Субстрат. Пока споровая взвесь настаивается в холодильнике, самое время заняться субстратом, который нужен для питания будущего мицелия. Известно, что растить грибы можно на самых разных субстратах, включая даже макароны, но чаще всего грибники выбирают зерновые, особенно неочищенную пшеницу. Она зарекомендовала себя как лучший и наиболее простой в приготовлении субстрат. Важно выбирать только то зерно, которое не обработано антигрибковыми веществами, иначе споры не выживут.

Так выглядит пшеница

Для субстрата походят стеклянные банки (лучше в широким верхом, чтобы удобно было вынимать обросший мицелием субстрат из банки). Можно брать большие, хоть на 3 литра, но практика показывает, что выгоднее использовать много небольших банок, по 250-500 мл, максимум 700 мл. Это связано со скоростью обрастания банки мицелием (чем меньше объём, тем скорее обрастёт) и с вероятностью заражения (заражённая банка подлежит замене, грибы из такого мицелия могут быть опасными для жизни, и чем больше объём банки, тем больше субстрата придётся выбросить при заражении).

Банка с широким горлом

Как приготовить субстрат?

Будущий субстрат можно сначала сварить, а потом разложить по банкам, а можно сразу положить в банки зерно и воду, плотно закрыть и поставить на стерилизацию (в скороварку или закрытую кастрюлю).

Для новичков рекомендуется первый вариант, поскольку даже при наличии рецепта сложно угадать пропорции и часто приходится переделывать. Дело в том, что влажность зёрен должна быть строго определённой, хотя и определяется обычно на ощупь и на глаз. В правильном субстрате капельки воды выделяются только при сильном сжатии зерна в руке. Если будет слишком много влаги, шансы заражения банки значительно возрастают.

Варят зерно обычно около 2 часов в большом количестве воды, затем процеживают и оставляют подсушиваться, завёрнутыми в вафельное полотенце. Можно чуть помять полотенце руками, иногда доставая зёрна для визуально проверки состояния. Когда влажность становится оптимальной, зёрна засыпают в чистые сухие банки примерно на ⅔ объёма или чуть меньше. Если засыпать слишком много, мицелий будет развиваться медленно из-за нехватки кислорода.

Частично обросший мицелием субстрат

Банки закрываются либо двумя слоями плотной фольги (в первом слое делается маленькое отверстие иглой, чтобы был минимальный доступ кислорода), либо в обычных винтовых крышках делается отверстие и закрывается пластырем крест-накрест. Затем на дно кастрюли или скороварки кладут небольшой кусок ткани, чтобы банки не лопнули, и ставят на тихий огонь часа на полтора. Важно дождаться полного остывания банок под закрытой крышкой до температуры окружающего воздуха, чтобы при открывании кастрюли банки не всосали в себя более холодный воздух, который не стерилен и может содержать нежелательные споры и организмы.

Как инокулировать?

Лучше открывать крышку кастрюли уже в чистом помещении, где будет производиться инокуляция. Игла шприца прокаливается над пламенем, затем аккуратно приоткрывается верхний слой фольги и впрыскивается около 2 мл взвеси в банку так, чтобы жидкость стекала не в центр, а по стенкам банки (так будет лучше видно колонизацию грибницей субстрата). Игла быстро и аккуратно вынимается (по возможности, не касаясь фольги), и второй слой фольги возвращается на банку. Можно впрыскивать и большее количество взвеси, но повышенная влажность может привести к развитию инфекций. Затем лучше плотно обвязать фольгу резинками для денег.

Прекрасный экземпляр мицелия, полностью колонизировавшего субстрат

Рост мицелия. Спустя неделю-две банки полностью обрастут белой грибницей. Часто она даёт «нити» (прожилки ещё более белого цвета, чем основной мицелий), когда становится мощной, это хороший признак. Чем больше мицелия в банке, тем ниже становится опасность заражения.

Как хранить банки с мицелием?

После инокуляции банки сразу ставят в тёмное и тёплое (в идеале от 25 до 30 градусов) место. Если тёмного места нет, банки заматывают фольгой или в несколько слоёв непрозрачными пакетами. Проверять банки не чаще раза в 2-3 дня на предмет роста мицелия и заражения. Всё просто: яркий белый или чуть желтоватый (повышенная влажность) или голубоватый цвет — здоровый мицелий. Любой неприятный запах или подозрительный цвет — содержимое банки срочно на выброс, банка моется и повторно стерилизуется. Можно слегка перетряхивать банки раз в пару дней, чтобы мицелий быстрее колонизировал субстрат, но делать это нужно очень аккуратно: так, чтобы зёрна не касались верха банки.

Плодоношение. Когда банки полностью побелели со всех сторон, мицелий готов к выставлению на плодоношение. Предварительно необходимо поместить банки на свет при температуре 21-23 градуса до появления первых маленьких грибочков-зародышей, которые называются примордиями (хотя начало плодоношения возможно и без них). После их появления можно выставлять грибницу на плодоношение. Теперь заражение почти невозможно, поскольку грибница уже сильная и сама справляется с инородными спорами.

На фото хорошо видны примордии и нитевидный мицелий. Этот экземпляр готов к плодоношению.

Как выставлять на плодоношение?

Главные условия для роста плодовых тел грибов — это очень высокая влажность (90%) и температура около 20-22 градусов (в основном, грибы будут расти в диапазоне от 18 до 25 градусов)

Есть несколько способов, но здесь остановимся только на одном.

В пластмассовой ёмкости с прозрачными стенками или хотя бы с прозрачной крышкой устанавливают пластмассовые судочки, в которые равномерно высыпают готовый мицелий из банок. Чтобы добиться идеальной влажности, часто используют специальные увлажнители воздуха, которые стоят от 20 долларов и легко монтируются в стенки ёмкости. На дно можно насыпать влажный вермикулит (продаётся в магазинах удобрений, садоводческих и т.п.) и уже на него ставить судочки с мицелием. Иногда обходятся без вермикулита, просто заливая воду в ёмкость, и прямо на воду ставят судочки.

Читайте также:  Подкормка домашних цветов аспирином

Простейший вариант: мицелий без покровного грунта, верх ёмкости закрыт пищевой плёнкой, а на дне вместо вермикулита вода

Обычно мицелий присыпают покровным грунтом. Это земля, предварительно простерилизованная в банке и остывшая до комнатной температуры. Она защищает грибницу от пересыхания и создаёт благоприятные условия для роста грибов. По опыту можно сказать, что грибы будут расти и без покровного грунта и без увлажнителя воздуха. 1-3 раза в день нужно проветривать ёмкость в течение нескольких секунд, а для повышения влажности можно сбрызгивать стенки водой из пульверизатора. Важно следить, чтобы капли влаги не попали на сам мицелий, чтобы тот не начал плесневеть.

Грамотный вариант

Если грибы долго не появляются, можно поставить грибницу в холодильник на сутки, а потом опять выставить в бокс для плодоношения.

Через 5-8 дней появятся грибы. Осталось собрать их и при желании высушить.

Это далеко не вся информация о выращивании грибов, здесь даны самые простые и понятные варианты для первых опытов в выращивании. Постепенно мы расскажем обо всех аспектах грибоводства более подробно.

Даже немного мицелия не пропадает зря

Источник

Руководство по культивации грибов вида Psilocybe Cubensis в домашних условиях (v2). Часть 1

Навигация

Навигация сквозная через все части руководства, поэтому можно кликать на нужную главу с любой страницы

Вступление

Привет, друже! Рад, что ты интересуешься такими штуками. В этом гайде я опишу минимально необходимый набор действий для выращивания большинства грибов вида Psilocybe Cubensis.

Важные моменты:

  1. Мой гайд направлен на использование наиболее доступных и недорогих вещей. Разумеется, ты сможешь добиться лучших результатов, используя лабораторное оборудование, ламинарные шкафы и стерильные камеры, но я предпочитаю искать наименее замороченные решения. Мне так интереснее.
  2. Я опишу саму суть процессов. Если ты умеешь думать головой, то всегда сможешь понять, что пошло не так, если уж пошло. А также сможешь внести свои коррективы и сделать что-то иначе, лучше, проще, веселее. Экспериментируй!
  3. Рекомендации по сборке девайсов написаны в духе «лаборатория на коленке». Что-то служит уже не первый год, и собирать новое красивое чисто для гайда я не соберусь, так что буду показывать то, что есть.
  4. Вероятно, некоторые моменты я случайно упустил. Так что задавайте вопросы через бота @mshrms_bot или, если бот молчит, на почту mushr00ms@protonmail.com (00 — это нули, тут просто шрифт такой)

Кстати, фотки взяты не из одного цикла выращивания. Некоторые оказались хренового качества, другие же просто забыл сделать. Так что я подцеплял иллюстрации из других своих репортов. Перед некоторыми главами я буду вкратце описывать, что потребуется для процесса, исключая посуду, которая есть в каждом доме. В квадратных скобках буду указывать [необязательное].

На фото, которые я использовал с первого гайда, сохранился водяной знак старого канала. Оригиналы я просрал, поэтому пусть висят как есть. Новых фоток местами не наделано, и чтобы не тянуть грибы за шляпы, я решил иллюстрировать тем, что есть в наличии. Если что, копировать или использовать в своих прекрасных руководствах мои фотки можно без разрешения, просто за спасибо 🙂

Принт-взвесь

Потребуется: главбокс, споровый отпечаток, вода для инъекций, новые шприцы, спирт, небольшой нож, [рюмка]

Итак, предположим, у тебя есть споровая взвесь в шприце или споровый отпечаток. В первом случае можешь пропустить этот шаг. Если нет вообще ничего — спроси меня через @mshrms_bot.

Если же у тебя в руках принт (отпечаток), во взвесь ты можешь его превратить как минимум двумя способами:

Первый способ:
Протри спиртом все необходимые штуки:

  • ампулу с водой для инъекций
  • запакованный новый шприц (5мл)
  • бутылёк спирта
  • зиплок с принтом
  • новую иглу или тонкий нож

Вместо чистого (96%) спирта можно использовать асептолин (70-90%) или любой раствор, с помощью которого аптеки пытаются обойти закон о строгом учете продаваемого спирта. На самом деле раствор в 75% даже лучше, потому что с водой он лучше проникает через мембраны бактерий и справляется с ними. На худой конец пойдет, конечно, и обычная водка, однако спирт испаряется быстрее и почти не оставляет лишней воды. Некоторые используют хлоргексидин в качестве замены. Рекомендовать не буду, потому что сам работаю только со спиртом, и в тексте буду упоминать именно его.

Также протри все поверхности внутри главбокса.

Glove box (главбокс) — герметичный ящик с перчатками, предназначенный для стерильных работ. Оснащен бактерицидной лампой. Вот моя версия: пеноплекс, гофры для унитаза, перчатки, оконный утеплитель и герметик. Сверху сначала я просто клал стекло, а теперь использую прозрачный пластик. Выглядит невзрачно, но служит не один год)

Плотно закрой его и включи бактерицидную лампу на 10-60 минут. Время зависит от мощности лампы и уверенности в чистоте поверхностей. Лично я включаю 8-ваттную лампу на полчаса.

Выключи, надевай перчатки и устройся поудобнее. Вскрой ампулу с водой. Если ампула стеклянная, обрати внимание на темную точку на ее горлышке — ломать нужно по нему, там есть надпил. Если пластиковая — просто срежь ее верх. Вскрой зиплок с принтом. Не залезая внутрь руками, выдвинь принт из зиплока и соскреби часть спор прямо в ампулу с водой. Четверти большого принта или половины маленького будет более чем достаточно. На самом деле, может хватить и одной десятой части, но ты же хочешь инокулировать много банок, верно?! Окей, не забудь закрыть принт.

Если производить такое с ампулой не хватает сноровки, используй для смешивания спор и воды обычную рюмку. Только убедись, что дно у нее не исцарапано, иначе в царапинах застрянет целая куча маленьких черных засранцев.

Далее вскрой шприц, насади на него иглу поплотнее. Перемешай взвесь в ампуле иглой, втяни её в шприц и закрой иглу колпачком. Если что-то пошло не так (например, что-то уронил) и нужны обе руки, можешь поставить шприц прямо в бутылек со спиртом, иглой вниз.

Теперь открой главбокс и подпиши на шприце сорт грибов и дату изготовления взвеси. Заверни его в фольгу или пакет и оставь в чистом месте при комнатной температуре на сутки. Всё, взвесь готова!

Второй способ:
Этот метод проще, но более расточителен в плане принтов. Главбокс не понадобится. Достаточно относительно чистой комнаты и стола. Итак, надень резиновые перчатки и протри спиртом стол и всё, перечисленное в первом методе.

Вскрой шприц, надень иглу и наполни его водой из ампулы. Затем протри спиртом принт ещё раз и сразу же проткни его иглой ближе к клапану. Выдави всю воду в зиплок, одной рукой зажми место прокола с иглой, а другой потри сквозь полиэтилен сам носитель со спорами, чтобы они отделились и смешались с водой. После этого втяни в шприц обратно уже готовую взвесь, закрой, подпиши и оставь споры регидрироваться на сутки. Этот метод чуть менее надежен и сжирает за раз целый принт, зато очень прост.

Подготовка субстрата

Потребуется: сухое зерно пшеницы, левомицетин в таблетках, вермикулит.

Итак, чем же любит питаться грибной мицелий?! С чем только грибные гроверы ни экспериментируют (особенно часто встречаю сомнительную на мой взгляд смесь кокосового койра, торфа и вермикулита), однако вперед по питательности сильно выбиваются злаковые культуры, а в особенности пшеница. Подготовка пшеничного субстрата также очень проста.

Ты можешь использовать любую пшеницу, как дорогущую для проращивания из ближайшего супермаркета, так и грязную, кормовую, которая продается мешками на соответствующих складах и базах.

Первым делом ее необходимо хорошенько промыть и избавить от мусора и шелухи. Удобно, что последняя сразу всплывает на поверхность. Затем залей пшеницу водой с запасом, накрой крышкой и оставь на сутки при комнатной температуре.

Я оставлял и на 12 часов, и на трое суток — все было в порядке. Сутки — просто рекомендация

Когда откроешь, не пугайся возможному сладковатому запаху закисания. За это время большинство бактерий в зерне «пробудилось» и начало радостно плодиться. А это значит, что теперь их гораздо легче уничтожить! Снова хорошенько промой пшеницу, опять залей воды с небольшим запасом, растолки в ложке 1 таблетку левомицетина и размешай в зерне.

Масса инструкций предписывает класть 1 таблетку левомицетина на литр зерна. На литр, Карл! Расчет крайне странный, ведь антибиотик растворяется в воде, и именно концентрация полученного раствора нас интересует, а не то, сколько зерна мы в нем будем вымачивать. Так что моя тебе рекомендация: клади 1 (одну) таблетку на весь объем. Будь то 4-литровая кастрюля или небольшое ведро. Сам я последнее время кладу полтаблетки, потому что достать антибиотики без рецепта не всегда легко

Теперь, прямо с этой водой ставь на плиту, на полном огне доведи до кипения, затем убавь газ и вари примерно полчаса. Время от времени перемешивай и определяй готовность на глаз: как только первые зерна начали развариваться, твой субстрат уже достаточно напитался водой.

Читайте также:  Древнейшие орудия для обработки почвы

Лучше немного недоварить, чем потом использовать кашу, потому что воздух должен проникать до самого дна твоих будущих банок. К тому же каша сильнее подвержена закисанию. Итак, вот как выглядит готовое зерно:

На этом этапе некоторые рекомендуют не промывать, чтобы сохранить на зернах питательный бульон, однако я предпочитаю все-таки промыть. Во-первых, так зерно более рассыпчато и его будет удобнее перетряхивать, а во-вторых, оно попросту быстрее охлаждается. Итак, прижми дуршлаг к кастрюле и, крепко сжимая их между собой, переверни, а затем поставь в ванну или другую кастрюлю. Дуршлаг можно заменить металлическим ситом. Дай воде стекать около получаса.

Теперь пришло время вермикулита. Этот минерал отлично впитывает лишнюю воду и отдает обратно, если воздух слишком сухой. Помимо контроля за влажностью используется для разрыхления почвы. Продается в магазинах типа «сад-огород».

Итак, досыпай в уже немного подсохшее зерно понемногу вермикулита, перемешивай и проверяй субстрат на влажность. Оптимальный вариант ты подберешь сам, с опытом, а пока просто возьми в сухую руку горсть зерна и, если чувствуется, что оно влажное, но ни капель, ни воды на руке не остается, значит вермикулита достаточно. У меня к этому времени смесь выглядит примерно так:

А это значит, что можно переходить к следующему разделу

Банки

Потребуется: скороварка, банки, «дышащий» пластырь или ватные диски, скотч, фольга.

В общих чертах, с тарой для субстрата дело обстоит так: она должна выдерживать температуру около 120 градусов (для стерилизации), плотно закрываться и иметь отверстия с фильтром для медленного газообмена — мицелию для развития очень нужен кислород.

Те, кто следил за моим каналом @mshrms, могли наблюдать смену моих предпочтений с банок на пакеты для запекания, а потом обратный (но усовершенствованный) процесс. Чем пользоваться тебе — решай сам. На мой взгляд, банки ведут себя гораздо более предсказуемо и в них гораздо сложнее случайно травмировать растущий мицелий. Кроме того, в них лучше видны зачатки заражения, закиси и зарождения иной неожиданной живности. Именно поэтому мой гайд будет про банки!

Итак, сойдут любые банки, которые влезают в твою скороварку (я чаще всего использую винтовые поллитровые). Сполосни банки и вылей всю воду. Добавь немного вермикулита на дно каждой банки. Немного, только чтобы скрыло дно. Это поможет лишней влаге, если она будет, уйти еще в самом начале.

Теперь заполни их готовым субстратом примерно на ¾. Можешь оставить чуть больше места, если в будущем будешь плодить банки уже обросшим зерном, а не взвесью. В этом случае их просто будет проще перетряхивать.

Далее, если банки винтовые, пробей дырку около 10мм в середине крышки. Я предпочитаю это делать самой толстой отверткой. Невинтовые банки заклей поверху скотчем внахлёст на 1см, и обмотай еще в один оборот вокруг горловины, чтобы закрепить края и прожги зажигалкой дырку в середине банки.

И, наконец, заклей отверстие пластырем в 1-2 слоя. Винтовые банки будут выглядеть так:

В последнее время я предпочитаю делать еще одно отверстие для инокуляции. В чем его удобство, объясню дальше:

Хорошо. Теперь крышки плотно закрой одним-двумя слоями фольги и прижми ее вокруг горловины. А дальше всё, что не влезло в скороварку, убери в холодильник или на балкон, если там сейчас прохладно. Далее, положи тряпку на дно скороварки, на нее банки, и залей водой на 2/3 уровня, но не выше горловин. Учитывай, что кипящая вода немного поднимется и может залить крышки.

Закрой крышку, обязательно проверь клапаны скороварки, затем поставь ее на максимальный огонь и разогрей до состояния, когда рабочий клапан будет стабильно шипеть. Теперь убавь газ до минимума, еще раз проверь резервный клапан (если он есть) и оставь банки стерилизоваться. Через 1 час выключи и либо оставь на плите, либо отнеси в прохладное место типа балкона. Охлаждать под холодной водой пока что нельзя, также как и спускать пар через клапан. Из-за резкого перепада давления и температуры банки могут треснуть, и их придется выбросить.

Примерно через 3 часа банки можно осторожно вытащить. Момент, когда уже можно, я определяю нехитрым способом: если могу держать руки на стенках скороварки 5 секунд, значит уже норм. Вытаскивай, немного встряхни, чтобы влага распределилась по зерну. И сразу ставь следующие банки, если все за раз не влезли. В принципе, 2-3 дня они простоят в холодильнике, и ничего с ними не случится, но лучше провести стерилизацию всего субстрата как можно быстрее.

Уже простерилизованные банки можно хранить при комнатной температуре, где-нибудь в более-менее чистом месте. Желательно, не снимая фольги.

Все получилось? Отлично, переходи к следующему этапу.

Инокуляция

Потребуется: [главбокс], шприц со взвесью, спирт, лейкопластырь, гентамицин в ампулах, нож/ножницы, [медицинская маска].

Теперь у тебя есть относительно стерильный субстрат, и за него начинается война всех голодных тварей, обитающих в твоем доме (ну, кроме кота). Вся живность, что ждет своего часа в хлебе, на стенах, в посудных губках, на любой поверхности, будет крайне рада попасть в такой очищенный от конкурентов оазис, как твои банки. Поэтому теперь твоя задача — максимально чисто переместить в банки главных её будущих жителей — споры твоих грибов. Задача не особо сложная.

Для начала тебе понадобится либо достаточно чистая комната, либо главбокс. Под понятие чистой комнаты не подпадает ванна с плесенью на стенах, кухня, подвал, баня и т. п. Предпочти им обычную жилую комнату с плотно закрытыми окнами и дверями. В ней не должно быть сквозняков и открытых вентиляционных каналов.

Сними одежду выше пояса, забери волосы и надень медицинскую маску на лицо. Протри руки и стол спиртом, поставь на него твои банки, бутылёк со спиртом, лейкопластырь, нож/ножницы и шприц со взвесью, тоже предварительно протирая все их поверхности. Старайся не нависать над столом во время всех манипуляций. Над столом должны быть только руки. Фольгу с банок лучше снимать уже непосредственно перед инокуляцией, но это не критично.

Так выглядит уже бывалая банка после снятия фольги

С опытом и количеством инокуляций можно упрощать процесс: я делаю все операции на кухонном столе, просто хорошенько орошая все спиртом.

Если нет уверенности в чистоте принта, то тебе понадобится ампула гентамицина (у меня это 5-10% случаев, во всех остальных всё прекрасно и без него). Отломи верх и набери в шприц 10% от емкости взвеси (не больше!). Например, если в шприце 5мл воды, добавь 0.5мл антибиотика. Через 20 минут можно продолжать процесс. Если прошел час или два, ничего страшного — продолжай, нужные споры довольно живучи.

Вот мой примерный набор

Сразу определись с местом прокола банок шприцом. Раньше я использовал ужасные ватные диски: игла гнется и путается в нитях ваты. Поэтому теперь рекомендую использовать дышащий пластырь, хоть для металла, хоть для скотча. Если ты делал в крышке дополнительное отверстие как на моих фото выше, тем лучше: это отверстие можно сверху залепить наглухо, в то время как основное должно остаться под теми же 1-2 слоями пластыря.

Пластырь, уже готовыми кусочками, всегда под рукой

Ладно, теперь хорошенько встряхни шприц, сними колпачок с иглы и поставь шприц в спирт. На одну из банок, в месте будущего прокола, наклей небольшой отрезок пластыря, но не до конца — край держи в одной руке. Другой еще раз протри место прокола спиртом (или сбрызни, если спирт у тебя в пульверизаторе), воткни шприц и выдави в банку 0.5-1.0мл взвеси.

Читайте также:  Как подкормить комнатные растения мочевиной

Рукой с пластырем сразу прикрой место прокола, затем вытащи шприц и сразу заклей пластырь до конца. Немного встряхни банку, чтобы взвесь распределилась по зерну, подпиши на банке название штамма и дату. Готово!

Ещё, в качестве заглушки на место прокола, себя неплохо показал обычный плотный рулонный пластырь. По нему же удобно отмечать отверстие под иглу. Сверху я его залепляю крепп-лентой. Так как она не особо впитывает спирт, то и быстро высыхает. Уже через минуту можно смело писать на ней обычной ручкой.

Что касается варианта с главбоксом, процесс выглядит так же, только еще более надежен, хотя и совсем не обязателен. Место возможного проникновения в банку контаминантов находится только в точке прокола. А так как оно изрядно заливается спиртом, вероятность заражения при правильных действиях крайне мала. В главбоксе вообще можно открыть крышку и вылить взвеси прямо на зерно.

Также, вместо пластыря можно использовать и скотч, только он крайне хреново клеится на мокрые от спирта поверхности. Пластырь в этом отношении гораздо лучше.

Обрастание

Теперь самая длительная фаза, в течение которой споры сначала освоятся на новом субстрате, прорастут в него волосками мицелия, встретятся с волосками спор другого «пола», объединятся и только тогда начнут весело и ризоморфно пожирать всё остальное. Таких «пар» будет много, они будут объединяться во что-то вроде колоний. И каждая такая колония будет являться носителем своего набора ДНК, который и будет выливаться в грибы разной формы, размеров. Если конечно вообще будет. Такое тоже бывает.

Именно поэтому наиболее эффективно будет инокулировать субстрат уже готовым кусочком мицелия или — и того интереснее — частью плодового тела гриба. Тогда-то уж всё поест один тип колоний, точно плодоносящий, с грибами выглядящими практически как донор. Такова очень приблизительная и краткая теория грибного размножения 🙂 Но с клонами и пересадкой мы начнем работать потом, а сейчас продолжим манипуляции с мультиспорой.

Итак, теперь инокулированный субстрат нужно поместить в темное, теплое и желательно сухое место. Темное — совсем, теплое — 27-33 градуса, сухое — чтобы не множить конкурентную флору. Для создания такой среды и нужен инкубатор.

Его почему-то часто путают с парником. Запомни: инкубатор — это темно, тепло и сухо! Именно здесь мицелий наслаждается своей вегетативной фазой и жрёт всё, до чего может дотянуться.

В его роли может выступить шкаф, коробка, сломанный холодильник, тумбочка, просто угол у батареи и так далее. Нагревателем же может служить батарея, лампа, электронагреватель любого вида, лохматый кот, ну и в таком духе. Я же для себя выбрал вариант с коробкой, склеенной из пеноплэкса, с термошнуром на дне и датчиком температуры. Ничего необычного. Проскочит еще на фотографиях.

Окей, помести банки в инкубатор и исключи постоянное попадание света в него. Поддерживай постоянную температуру (я предпочитаю около 31) и через 4-6 дней ты заметишь первые следы зарождающейся грибной жизни (через 6-10, если использовался антибиотик):

Осторожнее с банками в самом начале, пока зёрна еще не сцепились мицелием. Излишняя тряска может существенно растянуть процесс зарастания. Подожди еще немного и увидишь:

Цвет должен быть примерно вот такой. Серые или слишком плотные зефирные пятна — это не наше)) Если же всё было выполнено правильно, а мицелий растет и развивается, вскоре ты увидишь небольшие, но уже довольно плотные островки. Вроде таких (кстати, мой инкубатор на фоне):

Как правило, они образуются уже на 6-7 день после старта. А значит настала пора перетряхнуть субстрат, чтобы мицелий распространился равномерно по всему объему и начал охватывать его одновременно из всех маленьких новообразованных центров.

Для этого возьми банку и методично постучи по ней кулаком. Тебе необходимо добиться того, чтобы сгусток мицелия разбился на отдельные зерна и равномерно перемешался с еще неохваченным субстратом. Это будет довольно проблематично, если зерна в банке больше 3/4. Вот главная причина, почему не стоит заполнять ее под завязку. Итак, после этой процедуры зерно может выглядеть как неохваченное вовсе:

Это норма, просто ставь банки обратно в инкубатор и продолжай ждать. Теперь обрастание сильно ускорится. Как правило одного перетряхивания за цикл будет достаточно. Скоро мицелий начнет рост сразу из множества мест:

И ещё через 5-8 дней субстрат будет охвачен полностью:

Уже на этом этапе будет видна разница между стрейнами (штаммами). Вот, например, Ecuador, Pink Buffalo и Argentina:

Можешь подержать его в инкубаторе еще пару дней, если есть точки, которые вызывают сомнения. И на этом стадия зарастания завершена.

Теперь о том, что могло пойти не так. На стадии стерилизации можно случайно переварить субстрат в скороварке/кастрюле. Тогда выглядеть он будет примерно так:

В принципе, с небольшими такими проблемами мицелий может справиться и сам. Он съест всё вокруг, а несъедобную зону просто окружит плотной шубой. В данном случае, когда будешь извлекать мицелий, отдели его с запасом, чтобы не зацепить подкисающую кашу.

Или зерна в банке так много, что мицелий сам себе перекрыл приток воздуха через крышку, а значит будет расти медленно, мучаться, потеть и с высокой вероятностью бактериальная закись тоже испортит банку. Если рост действительно замедлился, попробуй в главбоксе рассадить банку на две отдельные или просто вытащи верхний слой ложкой, протертой спиртом. Только обязательно в главбоксе! Вскрывать стерилизованную банку в нестерильных условиях — это почти 100% гарантия ее потерять.

Излишняя вода в банке тоже может стать причиной закиси. Отличить этот момент можно по каплям в местах соприкосновения зёрен со стеклом. Решается эта ситуация перетряхиванием, если на дне достаточный слой вермикулита (5-10 мм), который впитает лишнее. Однако, если вокруг капель на стекле уже видны мутные ореолы или из фильтра появился едва уловимый кисло-сладкий запах, похожий на запах яблочного сидра – банку смело в утиль! Нет, не спасти! В у т и л ь!

А еще частая причина неудач с субстратом (особенно в первые разы) — это обычная плесень. Видишь ее в банке – действуй сразу. Как только эта дрянь разрастется, процесс выбрасывания может стать похож на пылевое торнадо. Некоторые банки я даже вывозил в лес, чтобы не отмывать туалет от черных туч.

Чаще всего тебе будут попадаться какие-нибудь представители пенициллов или триходерма, плотная белая шуба которого хорошо заметна на фоне воздушных нитей нашего мицелия (этот кадр уже с банки из парника, зеленую плесень на стадии зарастания я ловлю очень редко):

Также часто появляется в банках Aspergillus niger:

Аспергиллус мать его нигер! Гроза моих баночек)

Как правило всё это случается из-за плохой стерилизации или заражённого отпечатка. Так что только терпение и антибиотики, товарищи!

Еще отличным способом найти банку, которой прямая дорога в утиль — запах из инкубатора. Открываешь и сразу понятно — где-то шпион. Нужно понюхать все фильтры и любой запах, отличающийся от запаха свежих лесных грибочков, будет основным детектором.

А теперь рассмотрим ситуацию, когда там вообще ничего не растет. Вариантов может быть несколько. Самые вероятные это:

  1. В банке незаметно разрастается другая форма жизни — бактерии или контаминанты с отпечатка. Тут ничего не поделаешь, рано или поздно они себя проявят, и банка отправится в утиль;
  2. Слишком сухо. Нет даже испарины на стекле. Разумеется, такое есть никто не будет. Можно попробовать долить воды шприцом и перемешать. Это довольно редкий случай на самом деле. Нужно хорошенько пережарить зерна, чтобы они высохли или серьезно нарушить процесс;
  3. Слишком влажно. Свободная вода на стенках или на дне. Если на дне нет вермикулита для выравнивания баланса, смело начинай заново;
  4. Слишком много антибиотиков. Да, больше 1/10 от объема взвеси лучше не добавлять. И не держать дольше часа (обычно минут 15 достаточно).

Фух! Наконец-то можно перейти к кейсингу, хватит с меня этого зоопарка.

Источник

Adblock
detector