Санитарно показательные микробы почв

САНИТАРНО-ПОКАЗАТЕЛЬНЫЕ МИКРООРГАНИЗМЫ

Санитарно-показательные микроорганизмы (СПМ) – это представители нормальной микрофлоры, которые выделяются естественным путем в окружающую среду и там сохраняются, поэтому служат показателями санитарного неблагополучия, потенциальной опасности исследуемых объектов. Так, если на объектах обнаруживают нормальных обитателей кишечника, делают заключение о наличии фекального загрязнения и возможном присутствии патогенных энтеробактерий. Так как патогенных представителей меньше и выделить их труднее, то вначале выявляют санитарно-показательные микроорганизмы в окружающей среде, а после их выявления можно проводить поиск патогенных.

СПМ условно разделяют на 3 группы:

1.Группа А включает обитателей кишечника человека и животных, эти микроорганизмы расценивают как индикаторы фекального загрязнения. В нее входят бактерии группы кишечной палочки (БГКП) – эшерихии, энтерококки, протеи, сульфитвосстанавливающие клостридии (С. perfringens), термофилы, бактериофаги, ацинетобактер, аэромонады.

2.Группа В включает обитателей верхних дыхательных путей и носоглотки. В нее входят a- и b-гемолитические стрептококки, стафилококки (плазмокоагулирующие, лецитиназоположительные, гемолитические и антибиотикоустойчивые).

3.Группа С включает сапрофитические микроорганизмы, обитающие во внешней среде, их расценивают как индикаторы процессов самоочищения. В нее входят бактерии-аммонификаторы, бактерии-нитрификаторы, некоторые спорообразующие бактерии, грибы, актиномицеты, целлюлозобактерии, сине-зеленые водоросли.

Санитарно-показательные микробы должны отвечать следующим требованиям: они должны постоянно содержаться в выделениях человека и теплокровных животных и поступать в окружающую среду в больших количествах; не должны иметь другого природного резервуара, кроме организма человека и животных; после выделения их в окружающую среду, должны сохранять жизнеспособность в течение сроков, близких к срокам выживания патогенных микробов, выводимых из организма теми же путями; СПМ не должны размножаться в окружающей среде; не должны изменять свои биологические свойства в окружающей среде; должны быть типичными, чтобы их диагностика, индикация и идентификация осуществлялась без особого труда.

Санитарно-показательные бактерии окружающей среды.

1.Вода – бактерии группы кишечной палочки (БГКП), энтерококки, стафилококки.

2.Почва – БГКП, энтерококки, термофилы, возбудители газовой гангрены.

3.Воздух – бета-гемолитические стрептококки, стафилококки.

4.Пищевые продукты – БГКП, энтерококки, стафилококки, протей.

5.Предметы обихода – БГКП, фекальные стрептококки, стафилококки.

САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СМЫВА С РУК: ЦЕЛЬ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ.

Цель: Научиться брать смыв с рук и проводить санитарно-бактериологическое исследование для оценки санитарного состояния рук. Знать состав среды Кесслера.

День 1: Взятие смыва с рук стерильной увлажненной салфеткой и посев в среду Кесслера для обнаружения E.coli. Инкубация в термостате 44 о С 24 часа.

День 2: Учет роста на среде Кесслера (состав среды Кесслера (МПБ + желчь + лактоза + генцианфиолетовый + поплавок) — (газообразование при 44 0 С).Пересев на среду Эндо.

День 3: Учет роста красных колоний на среде Эндо. Приготовление мазка, окраска по Граму, микроскопия. Оксидазный тест.

МИКРОФЛОРА ВОЗДУХА

Микрофлору воздуха можно условно разделить на постоянную, часто встречающуюся, и переменную, представители которой, попадая в воздух из свойственных им мест обитания, недолго сохраняют жизнеспособность. Постоянно в воздухе обнаруживаются пигментообразующие кокки, палочки, дрожжи, грибы, актиномицеты, спороносные бациллы и клостридии и др., т.е. микроорганизмы, устойчивые к свету, высыханию. В воздухе крупных городов количество микроорганизмов больше, чем в сельской местности. Над лесами, морями воздух содержит мало микробов (в 1 м3 – единицы микробных клеток). Дождь и снег способствуют очищению воздуха от микробов.

В воздухе закрытых помещений микробов значительно больше, чем в открытых воздушных бассейнах, особенно зимой, при недостаточном проветривании. Состав микрофлоры и количество микроорганизмов, обнаруживаемых в 1 м3 воздуха (микробное число воздуха), зависят от санитарно-гигиенического режима, числа находящихся в помещении людей, состояния их здоровья и других условий.

При чихании, кашле, разговоре в воздух выбрасывается множество капелек жидкости, внутри которых содержатся микроорганизмы. Мелкие капельки образуют стойкие аэрозоли и могут часами удерживаться в воздухе во взвешенном состоянии. Заражение бактериями в этом случае происходит воздушно-капельным путем, так передаются грипп, корь, коклюш, легочная форма чумы и др.

При заражении «пылевым» путем микроорганизмы находятся в выделениях больных (мокроте, слизи) и окружены белковым субстратом, поэтому они более устойчивы к высыханию. Когда такие капли высыхают, они превращаются в бактериальную пыль, которая имеет диаметр от 1 до 100 мкм. У частиц диаметром более 100 мкм сила тяжести превышает сопротивление воздуха, и они быстро оседают. Пылевой способ играет важную роль в эпидемиологии туберкулеза, дифтерии, туляремии и др.

МИКРОФЛОРА ВОДЫ

Вода является естественной средой обитания микроорганизмов, она отражает микробный пейзаж почвы, так как микроорганизмы попадают в воду с частичками почвы. В воде формируются биоценозы с преобладанием микроорганизмов, которые адаптировались к определенным условиям. В 1 мл воды количество микробов может превышать несколько миллионов.

Количественный и качественный состав микробиоценозов зависит от физико-химического состояния, температуры, рН, от концентрации минеральных и органических веществ, кислорода, углекислого газа, скорости движения воды, от массивности поступления ливневых и сточных вод.

С экологической точки зрения всю микрофлору водоемов разделяют на две группы: автохтонную (или водную) и аллохтонную, попадающую извне. Автохтонная флора – это микроорганизмы, живущие и размножающиеся в воде. К ним относятся аэробные кокки: микрококки, сарцины; бактерии рода Proteus, рода Pseudomonas; представители рода Leptospira. Анаэробных бактерий в чистых незагрязненных водоемах мало. Микроорганизмы воды играют важную роль в круговороте веществ в природе. Они выполняют роль мусорщиков, расщепляют клетчатку, органические отходы. Вместе с загрязненными ливневыми, талыми и сточными водами в озера и реки попадают представители нормальной микрофлоры человека и животных (кишечная палочка, цитробактер, энтеробактер, энтерококки, клостридии) и возбудители кишечных инфекций – брюшного тифа, паратифов, дизентерии, холеры, лептоспироза, энтеровирусных инфекций и др., поэтому вода является фактором передачи многих инфекционных заболеваний. Некоторые возбудители могут даже размножаться в воде (холерный вибрион, легионеллы).

Вода артезианских скважин практически не содержит микроорганизмов. Микрофлора воды океанов и морей содержит различные микроорганизмы, например, галофильные вибрионы, поражающие моллюски и некоторые виды рыб, при употреблении которых в пищу развивается пищевая токсикоинфекция.

По степени микробного заражения воды различают три зоны: полисапробная зона – сильно загрязненная вода, бедная кислородом, богатая органическими веществами, в 1 мл ее содержание бактерий достигает 1 млн; мезосапробная зона – умеренно загрязненная вода, в ней происходит минерализация органических веществ с активными процессами нитрификации и окисления; олигосапробная зона чистой воды, в ней количество микроорганизмов в 1 мл воды составляет десятки и сотни, E.coli встречается в количестве нескольких клеток в 1 л воды.

МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОБЩИХ И ТЕРМОТОЛЕРАНТНЫХ КОЛИФОРМНЫХ БАКТЕРИЙ.

Определение общих колиформных бактерий (ОКБ).При анализе почв, для которых предполагается невысокая степень фекального загрязнения, рекомендуется использовать титрационный метод. В качестве ускоренного метода для анализа слабозагрязненных почв можно использовать метод мембранной фильтрации. При анализах проб с предполагаемой высокой степенью фекального загрязнения целесообразно проводить прямой посев разведении суспензии на поверхность среды Эндо.

Титрационный метод. Из первого разведения почвенной суспензии (1:10), прошедшей предварительную обработку, стерильной пипеткой берут 10 мл, что соответствует 1 г почвы, и засевают во флаконы с 50 мл жидкой лактозо-пептонной среды или среды Кесслера. Посев меньших количеств (0,01 г; 0,001 г и т.д.) делают по 1 мл из соответствующих разведении почвенной суспензии в пробирки с 9 мл той же среды. Посевы инкубируют в течение 48 ч при 37±1 0 С. Через 24±2 ч инкубации проводят предварительную оценку посевов. При отсутствии газообразования и помутнения через 48 ч инкубации выдают отрицательный ответ.

При наличии в посевах признаков роста (помутнения и газообразования или только помутнения) производят высев на среду Эндо и инкубируют в течение 18—24 ч при температуре 37±1 0 С. При наличии роста на поверхности среды Эндо розовых или красных колоний, малиновых с металлическим блеском или без него проводят микроскопию колоний с последующей постановкой оксидазного теста.

Метод мембранной фильтрации. Метод основан на фильтрации установленного объема — 5-10 мл почвенной суспензии первого разведения (1:10). Метод фильтрации почвы через мембранные фильтры проводится так же, как и фильтрация воды.

После окончания фильтрования фильтр переносят, не переворачивая его, на питательную среду Эндо с добавлением розоловой кислоты.

Под каждым фильтром на дне чашки делают надпись с указанием объема профильтрованной пробы, номера и даты посева.

Чашки с фильтрами ставят в термостат дном вверх и инкубируют посевы при температуре 37±1 0 С в течение 24±2 ч.

Если на фильтрах обнаружен рост изолированных типичных лактозоположительных колоний: темно-красных, красных с металлическим блеском или без него или других подобною типа колоний с отпечатком на обратной стороне фильтра, подсчитывают число колоний каждого типа отдельно и подтверждают их принадлежность к ОКБ (наличие оксидазной активности, отношение к окраске по Граму, ферментация лактозы до кислоты и газа).

Прямой поверхностный посев на агаризованные питательные среды. Посев почвенной суспензии в количестве 0,1 или 0,2 ми производят на поверхность среды Эндо шпателем. Посев при анализе сравнительно чистых почв производят из разведений от 1:10 до 1:1000, т.е. от 10 -1 до 10 -3 . При работе с загрязненными почвами обычно используют разведения до 10 -6 . Посевы выращивают в термостате при 37±1°С в течении 24 ч и проводят идентификацию выросших микроорганизмов аналогично тому, как изложено при описании титрационного метода и подсчета количества колиформных бактерий в 1 г почвы. Для этого среднее число колиформных колоний, выросших на чашке, умножают на степень десятикратного разведения. Результат выражают индексом.

Источник

Объект изучения микробиологии

Название	Объект изучения микробиологии
Анкор	Mikra_1-10 (2).docx
Дата	26.12.2017
Размер	6.2 Mb.
Формат файла
Имя файла	Mikra_1-10 (2).docx
Тип	Документы #13104
страница	28 из 29

Подборка по базе: Балалардың физикалық дамуын қазіргі заманғы ақпараттық және объе, ОП. 09 Основы микробиологии, санитарии и гигиены.doc, Методика изучения геометрического материала.doc, Этические проблемы создания искусственного интеллекта или Разум , реферат Алексеенко Технические средства защиты объектов морского, Методы и алгоритмы построения сложных трехмерных объектов.docx, Практическое задание (2 семестр изучения дисциплины)_bb20af2b721, Реферат по микробиологии.docx, Тест по темам «Вещество как объект изучения химии», «Система зна, Для изучения. КЕМЕРОВА Т А.docx

Основные характеристики санитарно-показательных микроорганизмов. СПМ должен постоянно обитать в организме чселовека или животных и постоянно выделяться во внешнюю среду.

СПМ не должен размножаться на объектах окружающей среды.

Длительность выживания СПМ во внешней среде должна соответствовать длительности выживания патогенных микроорганизмов.

Методы идентификации и дифференциации СПМ должны быть просты и удобны.

Для выявления общей микробной обсемененности определяют общее микробное число (ОМЧ) путем подсчета всех микроорганизмов (растущих на питательных средах) в 1г или 1мл субстрата. Количество СПМ выражают в титрах и индексах.

Санитарная оценка почвы по микробиологическим показателям. При санитарной оценке почвы учитывают результаты химического, микркобиологического и гельминтологического исследований.

-Микробиологическое исследование проводят для санитарной оценки почвы,. Характеристики процессов самоочищения, оценки методов обезвреживания отбросов, при определении пригодности участков для строительства, а также при эпидемиологических и эпизоотологических обследованиях с целью выяснения путей заражения почвы, продолжительности выживания в ней патогенных микробов и т.д. В зависимости от поставленной задачи применяют краткий или полный санитарно-бактериологический анализ почвы.

-Краткий санитарно-микробиологический анализ предусматривает определение общего микробного числа(ОМЧ), титров бактерий группы кишечной палочки (БГКП), энтерококков, перфингенс-титра(наименьшее количество почвы, в котором обнаруживается Clostridium perfringens), термофильных , бактерий, нитрифицирующих бактерий. Полученные результаты указывают на наличие и степень фекального загрязнения. Краткий анализ почвы осуществляется при проведении текущего санитарного надзора за состоянием почвы.

Полный санитарно-микробиологический анализ включает определение всех показателей краткого анализа, а также общей численности сапрофитов. ОМЧ и процентного содержания споровых микроорганизмов, аэробных бактерий, разрушающей клетчатку, бактерий-аммонификаторов.

Исследуют токсичность почв для микроорганизмов. Полный анализ проводят при осуществлении предупредительного санитарного надзора, первичном обследовании при выборе территории для размещении отдельных объектов.

Прямое обнаружение патогенных микробов в почве проводят только при расследовании вспышек инфекционных заболеваний. В качестве косвенных показателей возможного загрязнения почвы патогенными бактериями используют санитарно-показательные микроорганизмы: бактерии группы кишечной палочки, Cl. Perfingens, бактерии рода Proteus, термофильные бактерии. Наличие в почве бактерий группы кишечной палочки свидетельствует о ее фекальном загрязнении. В загрязненных участках почвы коли-титр составляет 1*10^4, тогда как в чистых почвах коли-титр может быть равен 1 и выше. Обнаружение Cl. Perfingens в почве также указывает на ее фекальное загрязнение.

Методы опредения состава и активности микроорганизмов почвы. Почвенная биота – это совокупность живых организмов, населяющих почву. В их число входят: бактерии, грибы, актиномицеты, водоросли, микроскопические животные, а так же лишайники и зеленая растительность, имеющая в почвах свою корневую зону. Обычно, чем плодороднее почва, тем больше в ней содержится живых организмов, и тем разнообразнее они по видовому составу. Биологическую активность почвы определяют следующими способами:

— подсчетом общего количества почвенных микроорганизмов

— определением количества отдельных физиологических групп , например микроорганизмов нитрифицирующих и целлюзоразлагающих бактерий. Появление нитрифицирующих бактерий указывает на развитие процесса самоочищения, так как они завершают цикл разложения азотосодержащих соединений, превращая аммиак в азот. При свежем фекальном загрязнении нитрификаторов не будет, поскольку субстрат для их развития отсутствует. В ходе жизнедеятельности микроорганизмов, разлагающих орг.вещества, образуется аммиак, что приводит к развитию нитрификаторов.

— определение выделения из почвы диоксида углерода – биохимический способ определения биологической активности почвы. Чем интенсивнее выделение углекислого газа из почвы, тем активнее происходит в ней биологические процессы, тем лучше условия для возделывания сельскохозяйственных культур и выше их потенциальная урожайность.

Отбор проб производят с квадратного участка(не менее 5*5) из 5 точек – из каждого угла и центра квадрата («метод конверта»). Образцы забирают в условиях асептики с глубины 20-30 см. объем образцов 1 кг.

Периодичность контроля: не реже 1 раза в год.
130. Микрофлора почвы. Санитарно-эпидемическое значение . определение общего колличества микробов в почве.

Почва является основным местом обитания микробов. Количество микробов в разных почвах варьирует. Так, унавоженная почва содержит – 5 млрд микробов, чернозем – более 4-х, глинозем – 200 млн клеток в 1г почве. Доминирующее место по количеству занимают бактерии. В пахотном слое культурной почвы на 1га может содержаться до 6 тонн микробной массы. Весной и осенью количество микроорганизмов увеличивается. Колличественный и качественный состав биоценоза зависит от влаги, содержания орг.веществ, структуры почвы, клим.условий, способа с/х обработки и т.д.

С санитарной точки зрения особое значение в микрофлоре имеет слоя почвы до глубины 50-70см. в самом поверхностном слое почвы количество микроорганизмов,ограничено из-за действия солнечных лучей, высушивания. Основная масса микробов содержится на глубине 10-20 см, их количество уменьшается на глубине 4-5м, почва практически стерильна. Важнейшей группой почвенного микробиоценоза являются сапрофиты, которые играют важную роль в самоочищении почвы, участвуют в круговороте азота, углерода, серы, железа и т.д. Патогенные микроорганизмы попадают в почву с испражнениями, мочой, мокротой, слюной, с трупами и т.д. Значит, часть их, не образующая споры, рано или поздно отмирает. Однако, есть такие, для которых почва – это естеств. форма

обитания (возбудители ботулизма, глубоких микозов, микотоксикозов, фитопатогенные бактерии и грибы). Роль почвы в передаче инфекции не так велика, т.к. в почве микроорганизмы встречаются с неблагоприятными для них факторами: недостаток пит.субстратов, антаганизм почвенных сапрофитов, высыхание, действие солнечного света и т.д. В основном длительно сохраняются спорообразующие аэробные(возб. сиб.язвы) и анаэробные(возб. Столбняка, газ. Гангрены) бактерии. Сроки их выживания – 25 лет, но и неспорообраз. Могут сохранятся до нескольких месяцев.

Для характеристики в почве общего микробного загрязнения используют определение численности микроорганизмов, преимущественно бактерий, растущих на мясо-пептонном агаре при 37°С. При этом производят посев почвенных разведений 1,5% мясо-пептонный агар. Из каждой пробы почвы должно быть использовано для посева не менее двух различных разведений в зависимосте от степени педполагаемого загрязнения исследуемой почвы. Перед посевом каждое разведение тщательно перемешивают стерильной пипеткой , после чего берут 1мл суспензии и переносят на дно стерильной чашки. Из каждого разведения посев производят минимум на 2 параллельные чашки. После в каждую чашку вливают предварительно расплавленный и остуженный до 45°С пит.агар в количестве 15-20мл. чашки петри с раплавленным агаром хорошо перемешивают с имеющейся там почвенной суспензией, осторожно наклоняя чашки во все стороны. Затем чашки помещают на строго горизонтальную поверхность до затвердевания среды. На чашке должна быть сделана надпись с указанием номера и названия пробы и разведения. После застывания агара чашки с посевом помещают в термостат в перевернутом виде (крышкой вниз) при 37°С на 24 часа.

После инкубации подсчитывают выросшие колонии и проводят пересчет на 1г абсолютно сухой почвы.
131. понятие о санитарно – показательных микроорганизмов.

Санитарно-показательные микроорганизмы являются постоянными обитателями поверхностей и полостей человеческого или животного организма. Обнаружение и в объектах внешней среды свидетельствует о загрязнение выделениями человека или животного. Чем обильнее такое загрязнение, тем больше возможность попадания в объект патогенных микробов. Санитарно-показательными микроорганизмами могут быть только те, которое постоянно и больших количествах содержатся в выделения человека или животного, они должны сохранять жизнеспособность во внешней среде в течении сроков, близких к срокам выживания патогенных микробов, выделяемых теми же путями , но не размножаться интенсивно во внешней среде. Они должны также легко обнаруживаться современными и довольно простыми методами исследования. Основными санитарно-показательными микроорганизмами в отношении кишечных инфекций, указывающими на фекальное загрязнение внешней среды (вода, почва), считают бактерии группы кишечных палочек (БГКП). В качестве дополнительных показателей при оценке некоторых объектов определяют наличие фекальных стрептококков(энтерококков) и клостридий

К БГКП относятся не только эшерехии, но и представители родов цитробактер, энтеробактер, клебсиеллы. Для них характерны следующие признаки:короткие, грамотрицательные , неспорообразующие палочки, на среде Эндо они растут в виде темно-красных колоний с металлическим блеском или без него либо в виде розовых колоний с темным центром; сбраживают лактозу и глюкозу при 37°С в теч.24ч с образ. Кислоты и газа.

Все БГКП попадают во внешнюю среду только из кишечника человека и животных. Наибольшее санитарно-показательное значение в этой группе имеет E.coli, присутствие которой, например, в питьевой воде, рассматривается как признак свежего хоз.-бытового загрязнения.

Писутствие энтерококков считают дополнительным показателем фекального загрязнения воды и др. объектов. Однако их выделение требует сред более сложных при приготовлении и растут они медленнее. Энтерекокки явл. Нормальными обитателями кишечника, но выделяются во внешнюю сребу в меньших кол-х, чем кишечные палочки.

К санитарно-показательным клостридиям относят группу грам+, спорообраз. анаэробных палочек, редуцирующих сульфит на сульфит-неомицинполимиксиновой среде (СПН) при инкубации в условиях 45°С в теч.12-24ч. Эта группа в основном представлена Cl.perfringens. определение санитарно-показательных клостридий рекомендуют проводить в почве и воде, используемой на предприятиях пищевой промышленности, а также при выборе новых источников водоснабжения.

санитарно-показательными микробами загрязнения воздуха закртых помещений являются стафилококки, гемолитические стрептококки.чем больше количество стрептококков обнаруживают в воздушной среде, тем вероятнее возможность заражения чел-ка воздушно-капельными инфекциями. Нарастание обсемененности воздуха Staph.aureus и частое его обнаружение свидетельствует о санитарно-эпидемиологическом неблагополучии. В лечебных учреждениях вторичным источником обсеменения воздуха Staph.aureus могут быть загрязненные постельные принадлежности, белье.

132. способы повышения микробной чистоты нестерильных лекарственных средств.

Пути повышения микробной чистоты нестерильных лек.средств. В зависимости от источников и путей попадания микроорганизмов в лекарственные средства возможны различные подходы к обеспечению требуемого уровня микробной чистоты нестерильных ЛС. Если микробное обсеменение вызвано попаданием вместе с сырьем, то для достижения требуемого уровня микробной чистоты достаточно очистить от микроорганизмов сырье. Если обсеменение микробами происходит в процессе изготовления, то проводят деконтаминацию готовой лекарственной формы. Предварительной деконтаминации можно достичь прессованием сыпучих материалов (при отсутствии споровых микроорганизмов, низкой влажности исходного порошка и высоком давления). На практике применяют 4 способа деконтаминации сырья и готовых ЛС. Термический способ. Широко распространенный метод промышленной деконтаминации. Не пригоден для обработки термолабильных лекарственных форм, для которых применяют прогревание до 60-70°С горячим воздухом, инфракрасное и высокочастотное излучение. Химический способ. Более пригоден для стерилизации посуды, трубопроводов и прочих изделий из полимерных материалов. Стерелизирующий агент – окись этилена или смесь окиси этилена и бромистого метила (в соотношении 1:25). Для непосредственной деконтаминации ЛС этот способ применяют ограничено. УФ-облучение. Существенным ограничением для более широкого использования метода признана его неэффективность при обработке светонепроницаемых веществ. Наиболее часто его используют для обработки упаковочного материала и технологической воды. Ионизирующее излучение обладает высокой проникающей способностью. При облучении не образуются канцерогенные, мутагенные, токсичные вещества, сохраняются физико-химические и биологические свойства обрабатываемых лекарств. Метод используют для обработки антибиотиков, витаминов, ферментов , гормонов и алколоидов.
133. бактериологическое исследование стерильных лек.средств.

Инъекционные растворы, глазные капли, лек.средства для новорожденных, др. лек.препараты, стерилизуемые в процессе их изготовления, засевают неразведенными в тиогликолевую среду для определения микробной обсемененности и среду Сабуро. Посевы на тиогликолевой среде выдерживают 14 суток при 24°С. Учет результатов посевов проводят по отсутствию видимых изменений в посевах.

Определение микробной обсемененности готовых лекарств. Жидкие лек. формы разводят стерильным физ.раствором 1:10 (или 1:100) и засевают в объеме 0,5мл на МПА в чашке Петри. 1г порошка или таблеток помещают в пробирку с 10мл физ.раствора и после растворения производят посев на МПА. Мягкие лек.формы (мази, пасты) в кол-ве 1г взвешивают в асептических условиях, переносят в пробирки с 10мл стерильного 1,4% раствора натрия гидрокарбоната для диспергирования, которое производят вращательным движением пробирки между ладонями в течении 2-4 мин, 0,5 мл полученного раствора засевают на МПА в чашках Петри. Далее чашки помещают в термостат на 48 часов затем подсчитывают число колоний и определяют количество бактерий в 1 мл или 1г образца
134. санитарно-микробиологическое исследование инвентаря, оборудования, рук и санитарной одежды работников аптек

Санитарная одежда – мед.халат и шапочка, предназначенные для защиты медикаментов, материалов и других загрязнений, выделяемые пресоналом.

Аптечную посуду, подготовленную для розлива инъекционных растворов и глазных капель, отбирают в момент приготовления их в количестве трех штук одинаковой емкости.

Флаконы доставляют в лабораторию в укупоренном виде, используя при этом пробки и прокладки, для отпуска лек.средств.

Исследование аптечной посуды, пробок, прокладок, воронок, цилиндров:

Подготовка к исследованию: три одноименных флакона, доставленные в лабораторию, последовательно ополаскивают в 10 куб.см стерильной водопроводной воды.

Воду из флакона во флакон переливают над пламенем горелки, тщательно споласкивая каждый флакон. В банки и широкогорлые колбы с доставленными пробками и прокладками наливают 10 куб.см стерильной водопроводной воды и тщательно споласкивают.
135.методы контроля микробной загрязненности растительного лек.сырья

Лек. Растительное сырье может инфицироваться патогенными микробами на всех этапах заготовки (сбор, первичная обработка, сушка, измельчение, упаковка) и хранения. При хранения сырья важно соблюдение санитарного режима в аптеках. Неблагоприятное действие оказывают влажность, пыль, насекомые и др.факторы, повышающие микробное обсеменение и приводящие к порче лек.сырья. Внешними проявления микробной порчи раст.сырья являются изменение цвета и консистенции, загнивание, плесневение всего растения и или его частей. При этом резко снижается содержание или полностью исчезают фармакологические активные вещества , использование такого недоброкачественного сырья становится бесполезным или вредным. Легко портятся плоды, ягоды и корневища, богатые углеводистыми соединениями, более устойчивыми являются сухие листья, корни, кора. Состав микроорганизмов зависит от вида лек.сырья, его структуры и фармакологических свойств. Преобладают грибы, актиномицеты и спорообразующие виды бактерий.

Определение микробной обсемененности раст-го лек.сырья:

В асептических условиях(в стерильной чашке Петри, обожженными ножницами и пинцетом)из листа или верхнего слоя корневища вырезают кусочек площадью 1, который помещают в пробирку с 10мл стерильного физ.раствора и взбалтывают в течении 5мин. Из полученного смыва готовят 4 десятикратных разведения (1:10, 1:100, 1:1000, 1:10000), для посева в связи с с большой обсемененности раст.сырья используют два последних (1:1000, 1:10000)разведения. В стерильную чашку Петри вносят 1 мл смыва, после чего в нее наливают 15мл расплавленного и остженного до 45°С МПА, перемешивают и после застывания агара посевы инкубируют при 37°С 24-48 часов. Производят подсчет выросших колоний на поверхности и в глубине агара. Полученное число колоний следует умножить на степень разведения.
136. Санитарно-микробиологическое исследование сухих веществ, используемых для приготовления лек.форм.

Исследования проводят в случаях неоднократных неудовлетворительных бактериологических анализов, превышения норм предельно допустимого содержания непатогенных микроорганизмов при удовлетворительных результатах анализов дистиллированной воды используемой для их приготовления, при удовлетворительных данных бактериологического контроля посуды, флаконов, пробок, прокладок. Результаты, полученные при исследовании сухих лекарственных веществ, служат одним из оснований для выбора партии при приготовлении инъекционных растворов. Сухие лекарственные вещества разводятся стерильной дистиллированной водой с целью создания соответствующих концентраций инъекционным растворам и глазным каплям, изготовляемым в аптеках. Отбор сухих лекарственных веществ проводят стерильными ложками в стерильную посуду лаборатории в количестве 30 — 50 г. В случае, если вещество таблетированное, то отбирают фламбированным пинцетом в стерильную посуду лаборатории в количестве 30 — 50 г.

Аптечную посуду, подготовленную для розлива инъекционных растворов и глазных капель, отбирают в момент приготовления их в количестве трех штук одинаковой емкости.
Флаконы доставляют в лабораторию в укупоренном виде, используя при этом пробки и прокладки, для отпуска лекарственных средств.

Источник

➤